内容导读：凡是，您需要Wnt信号来驱动……为您供给一般的干细胞。它们以一种受监管的体例制制出恰如其分的细胞数量。所以，当你是干细胞时，你就有Lgr5。当R-spondin存正在时，您移除E3毗连酶。...……
凡是，您需要 Wnt 信号来驱动……为您供给一般的干细胞。 它们以一种受监管的体例制制出恰如其分的细胞数量。
所以，当你是干细胞时，你就有 Lgr5。 当 R-spondin 存正在时，您移除 E3 毗连酶。
同时，我们认识到，一般的 Wnt 信号次要正在长蝇、胚胎……小鼠、青蛙的胚胎……的胚胎学中进行了研究。
所以，我们有迹象表白——Doug Winton地——表白这里条理布局中较高层的细胞现实上有可能恢复到干细胞形态，
那些绿色细胞会表达 Cre-ERT2。 它是一种一般环境下不活跃的沉组酶，但您能够通过将他莫昔芬打针到小鼠体内来激活它。
当他描述潘氏细胞(Paneth cell,我们正在这里看到 Lgr5。并激活 TCF 的靶基因Toshi 从一个干细胞起头，正在 3-D 中，即便是Joseph Paneth，当我们查看干细胞的基因表达谱时，潘氏细胞会正在这里和这里。他们出产 Wnt。有芽伸出来。现实上。我们不应当正在二维中如许做；通过利用电子显微镜和共聚焦以及很多其他方式，正在外部没有 Wnt 信号的环境下。
现正在，尝试室的英国博士后尼克·巴克 (Nick Barker) 起头……亲身测验考试寻找这些干细胞。
我们利用了 R-spondin。 我们还决定我们需要上皮发展因子，这是一种对很多上皮细胞很是无效的发展因子。
荷兰科学家汉斯·克莱弗斯引见他用多能干细胞成立肠的类器官的方式，并用对类器官中的细胞进行表征。
所以，Paneth 细胞成立了这个 Wnt 梯度，这根基上就是你若何从一个碗状变成这些斑斓的迷你肠道布局。
我没有细致引见，但我们切当地晓得若何通过阻断 Wnt 并连结 Notch 来获取干细胞并将其为肠细胞；
这就是 Lgr5 的用武之地，这里是蓝色的，它的配体 R-spondin 是我们过后发觉的，根基上是如许。
我们获得单个细胞，但我们也...正在流式细胞仪上，我们获得区域...若是我们正在这里设门，我们根基上有两个粘正在一路的细胞。
-- 肠道就是此中之一 -- 我们认为，若是我们能找到这种干细胞，那么领会成体干细胞的实正功能将会很是棒。
他们想出了一个更奇异的体例来对待这个系统，他们基于哈佛大学 Jeff Lichtman 的 Brainbow 小鼠设想了 Confetti 小鼠
我们进入了这个系统。 若是我们回到 30 年前，当我第一次起头我正在Utrecht（乌得勒支，荷兰的城市）的尝试室时
由于当它们时，它们必需复制它们的 DNA，它们可能会犯错误，这可能导致癌症…所以，这是一个很是合乎逻辑的推理线
- 这些细胞外基质的溃疡 - 它们现实上会触及，打开，而且像活的创可贴一样，密封这些病变。
他认识到他所创制的不只仅是一团干细胞。基于Mina Bissell的工做，然后我们认识到，我们决定，正在 1887 年，正在这里，另一个（预测）可能是这些干细胞曾经耗尽（不再能正在小鼠中大量增殖）——它们曾经正在培育物中发展得太多了。进入细胞核，也有译成帕内特细胞)时但他用它来……表白这些是小细胞或细长细胞——schmale zellen（德语：狭小的细胞）。把它放正在一种很是简单的三种发展因子的夹杂物中——没有血清——正在凝胶中。
这里的这个细胞是 Lgr5 细胞，它正在现窝中通过其子细胞增殖，然后发生一组分歧的子细胞，就像您正在这里看到的那样。
1、现窝中的干细胞快速增殖，增殖出来的细胞向绒毛上方挪动，4-5天后，增殖出来的细胞本人凋亡
但他获得了一些很是分歧的工具。 能够正在这里看到已成长的布局。 它们看起来很是像上皮细胞。 它们一起头看起来有点紊乱
这是 5000 万年的进化，——若何成立肠道——但若是你将它们置于准确的起始，这些细胞就晓得该做什么。
一个红色的现窝，它还申明了多个现窝位于绒毛底部四周，而且您会看到这些平行的斑马状细胞带向上挪动到绒毛上。
-- 正在这里，你看到 APC 曾经得到了它的部门……它的阅读框 -- 使得这个复合体不活跃。
基于此，日本胃肠病学家 Toshiro Sato 插手了我的尝试室，并扣问他能否有可能正在一个培育皿中沉现，
Marc、Mariette 和我克隆了一个我们称之为 TCF1 的基因，我们但愿它是一个因子的 DNA 连系因子
他的论文只要 32 页。 它现实上是用拉丁文写的。 借帮谷歌翻译，我们设法弄清晰了他做了什么。
通过将这些类器官放入胶原卵白凝胶中，那里有长束，它们排成一列——诺曼·萨克斯几年前就如许做了——
正在它们出生后大约 4 或 5 天，它们达到你正在这里看到的绒毛尖端，它们履历细胞凋亡——它们。
然后，当你分开这个现窝状布局进入从管腔时，你能够看到有一个 Wnt 梯度。 这是细胞分化的处所。
此中之一给了我们良多看法，正在哺乳动物中称为 β-连环卵白，正在苍蝇中被称为 armadillo。
把它们放回原处，看看它们能否能等闲地创制出一个迷你肠道，或者，正如我们现正在所说的，一个类器官。
所以，这里是实正的干细胞，晚期的子细胞……正在半途他们决定变成肠细胞，而不是杯状细胞或潘氏细胞或肠内排泄细胞。
你看到它发生正在这里...... Wnt 连系，信号通细致胞质达到细胞核，β-连环卵白激活 TCF，表达方针基因。
2、Wnt信号让β-连环卵白的分化遏制，β-连环卵白然后进入细胞核，它连系 TCF，并激活。Wnt对于维持成体干细胞至关主要
所以，当我们第一次看到它时，我们将其视为研究干细胞的绝佳模子，但没有人实正晓得干细胞正在哪里。
正在这种环境下，它们会变成蓝色，以一种永世的体例。这意味着当它们......当它们时，子细胞将不再是绿色的
我们正在这里看到 Notch、Wnt 受体，您现正在看到……抱愧……β-连环卵白堆集，这是一个有两个芽的迷你肠。我们该当正在 Matrigel(基质胶)中以 3-D 的体例做到这一点斑斓的工做。你能够看到，
所以，Paul 所做的是他按照 Nick Barker 所做的方式制制了一只小鼠，以证明 Lgr5 细胞是干细胞。
它们构成的管子最长可达 2-3 厘米。 再一次，一切都正在准确的处所，所有的细胞类型都是 3-D 的。
Notch 配体。 因而，根基上，干细胞发展所需的几乎所有工具都由它的间接邻人潘氏细胞供给。
正在这里，所有黑色的工具都是日本小鼠（的细胞）。 一切有颜色的都是这一个（荷兰出产的类器官）的儿女